background image

            Тема 4 : Качествено определяне на белтъците по 
биуретовия метод 

I.

Теоретична част

Биуретовата реакция открива пептидна връзка (­ C – NH ­) в белтъците. В алкална 
среда при взимодействие на белтъците с медните йони разтворите се оцветяват в 
синьо­виолетов цвят, в продуктите на пълната – белтъчна хидролиза (пептони) – 
дават розово оцветяване. Положителна биуретова реакция дават вещества, които 
съдържат нe по­малко от 2 пептидни връзки. Биуретовата реакция се основава на 
образуването на биуретов меден комплекс в резултат на свързването на Cu с 
пептидна връзка , за която е характерна кетоформата, докато енолната й форма 
рядко се среща в пептидите. 

В алкална среда, полученият биуретов комплекс 

претърпява  пълна енолизация по схемата !

                        O                                           OH

­ 

                      OH      

  H

2

N – CH – C – N – CH ­ ..R

n

 – COOH            H

2

N – CH – C = N ­ CH ­ ..R

n

  COOH

              R

1

            H                                                         R

1

Белтъците са най – разпространените биополимери в природата. Те са 
високомолекулни кондензати на АК амидно свързани в определен ред, т.е. те са 
полипептиди, свързани с повече от една пептидна връзка.

II.

Експериментална част

Задача.1 

Да се докаже наличието на белтък в изследвана проба.Като се използва 

биуретова реакция, да се определи количеството съдържание на белтък в пробата.

Опит1.

Биуретова реакция за доказване на белтък – цветна реакция за откриване на 

пептидна връзка. Характерно е за всички белтъци. В алкална среда и в присъствие на
Cu

2+

 белтъчните разтвори се оцветяват в синьо­виолетово. Дължи се на образувалото

се комплексно съединение на Cu с пептидни групи (­ CO – NH ­ ). Биуретовата 
реакция се получава и с продуктите от непълната хидролиза на белтъците – пептони 
и полипептиди. Интензивността на оцветяване зависи от дължината на пептида и 
варира от синьо­виолетово до червено.

Това е само предварителен преглед!

Качествено определяне на белтъците по биуретовия метод

Биуретова реакция за доказване на белтък – цветна реакция за откриване на пептидна връзка, xарактернa за всички белтъци. Определяне количеството съдържание на белтък в пробата...

Качествено определяне на белтъците по биуретовия метод

Предмет: Биохимия, Биология
Тип: Протоколи
Брой страници: 4
Брой думи: 374
Брой символи: 2166
Изтегли
Този сайт използва бисквитки, за да функционира коректно
Ние и нашите доставчици на услуги използваме бисквитки (cookies)
Прочети още Съгласен съм